这是达·芬奇为米兰圣马利亚修道院餐厅所作的一幅壁画，创作于1495～1498年间，面积约42平方米。画面显示耶稣与12个门徒进晚餐时，说罢“你们中间有一个人要出卖我”之后一刹那的情景。达·芬奇以其深邃的想象力，把每个人物的内心活动表现无遗。画面以三人为一组。右端三人正在惊相探问，其中第三人把双手伸向耶稣，好像在问：“难道竟真有人出卖老师？”旁边那组一人两手闷胸，一人伸开双臂，一人伸出手指；他们既万分惊讶，又表明心地清白。左端三人面向耶稣，最边上的那个青年一跃而起，好像想知道事态的发展；中间那位两眼瞪视，神态十分震惊；他身旁的老人摇着双手，好像在想：怎么竟会发生这样的事。左边靠中间的三人，边上那位也从座位上跳起来，情绪激昂，右手握着一把餐刀（这人名叫彼得，是耶稣最大的门徒，据说耶稣被捕时，他曾挥舞刀剑加以抵制）；旁边那位低下头去，垂着双眼，神情不胜悲痛；坐在他们两人中间的就是犹大，他脸色惊慌失措，可是右手还紧握着他因出卖耶稣而得到的30枚银币的钱袋。耶稣端坐在餐桌中间，神态平静肃穆，夕阳正好照在他的脸上，更增加了他的光明磊落，而犹大的脸却隐在暗处，衬托出他的阴险卑鄙。达·芬奇在画中不但刻画出人物的典型性格，还寄托着对善恶的褒贬。